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有濟(jì)模型 | 銀屑病動物藥效模型

銀屑病是一種常見的慢性炎癥性疾病,其在全球的患病人數(shù)目前已達(dá)1.25億之多,約占全球人口的2%~3%。銀屑病是一種臨床表現(xiàn)為紅斑、斑塊、鱗屑的慢性炎癥性皮膚病。能引發(fā)多種并發(fā)癥,如關(guān)節(jié)炎、心血管疾病和代謝綜合癥。其發(fā)病機(jī)制至今不清,目前認(rèn)為與遺傳、環(huán)境和免疫等多因素相關(guān)[1]。


為了探究銀屑病的發(fā)病機(jī)制及新的治療手段,建立合適的動物模型至關(guān)重要。至今已開發(fā)出藥物誘導(dǎo)模型、細(xì)胞因子誘導(dǎo)模型、異種移植模型和基因工程模型等多種模型方法[2]。


有濟(jì)醫(yī)藥藥效技術(shù)平臺在銀屑病藥效學(xué)研究領(lǐng)域深耕多年,已成功建立了咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠銀屑病模型、IL-23誘導(dǎo)小鼠耳廓銀屑病模型等助力合作伙伴開展干細(xì)胞、外泌體、小分子化藥等產(chǎn)品的非臨床藥效學(xué)研究。

部分模型數(shù)據(jù)展示:






一、咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠銀屑病模型


1.模型介紹

咪喹莫特作為一種Toll樣受體免疫激活劑,其通過TLR7和TLR8激活樹突狀細(xì)胞,產(chǎn)生IFN-α、IFN-γ、TNF-α等炎癥前期因子,還能增加趨化因子如巨噬細(xì)胞炎癥性蛋白(MIP)和單核細(xì)胞趨化蛋白的產(chǎn)生[3]。采用6~8周齡BALB/c小鼠,通過在背部局部脫毛,在脫毛區(qū)域和耳部皮膚,每日定量涂抹5%咪喹莫特軟膏進(jìn)行銀屑病造模,一般在第2~3 d即可出現(xiàn)炎癥反應(yīng),第6~7 d銀屑病樣病變可達(dá)高峰。造模產(chǎn)生的小鼠皮損具有典型的銀屑病表現(xiàn)和組織學(xué)特點(diǎn),其中包括表皮的過度增生、角化不全伴角化過度、棘層增厚和炎癥細(xì)胞浸潤等。

2.模型背景數(shù)據(jù)圖

圖片1.png

圖片2.png

圖1 咪喹莫特誘導(dǎo)銀屑病(A)皮膚拍照、(B)厚度檢測、(C)PASI評分、(D)HE染色、(E)Baker評分、(F)脾臟指數(shù)

3.數(shù)據(jù)圖解讀


咪喹莫特涂抹造模后,與正常組相比,模型組小鼠皮膚出現(xiàn)鱗屑、紅腫、浸潤等銀屑病樣病變(圖1.A),皮膚厚度增加(圖1.B),PASI(Psoriasis area and severity index,銀屑病面積和嚴(yán)重程度指數(shù))評分上升(圖1.C),小鼠皮膚角質(zhì)層出現(xiàn)Munro微膿腫、角化不全,表皮層棘層細(xì)胞增厚,真皮層血管擴(kuò)張、炎癥細(xì)胞浸潤等病理癥狀(圖1D),Baker評分顯著上升(圖1.E),脾臟指數(shù)顯著增加(圖1.F),以上結(jié)果表明模型制備成功;與模型組小鼠相比,治療組小鼠上述癥狀均得到明顯緩解。





二、IL-23誘導(dǎo)小鼠耳廓銀屑病模型


1.模型介紹

在各種細(xì)胞因子注射小鼠模型中,注射IL-23是最為常見的建模方式[4]。皮內(nèi)注射IL-23可通過IL-23/Th17軸誘發(fā)炎癥—IL-23激活下游反應(yīng)誘導(dǎo)分化Th17細(xì)胞,Th17專職分泌IL-17和IL-22作用于角質(zhì)形成細(xì)胞和其他組織細(xì)胞引起皮膚細(xì)胞炎癥損傷。隔天多次向6~8周齡C57BL/6雌性小鼠耳朵皮內(nèi)注射20 μL含量為0.5 μg的IL-23進(jìn)行造模。

2.模型背景數(shù)據(jù)圖

圖片3.png

圖片4.png

圖2 IL-23誘導(dǎo)銀屑?。ˋ)厚度檢測、(B)脾臟指數(shù)、(C)Baker評分、(D)IL-23A表達(dá)量、(E)HE染色


3.數(shù)據(jù)圖解讀


結(jié)果顯示IL-23注射造模后,與正常小鼠相比,模型組小鼠出現(xiàn)皮膚厚度(圖2.A)和脾臟指數(shù)(圖2.B)顯著增加,病變部位皮膚角化不全、Munro微膿腫、棘層細(xì)胞增厚、炎癥細(xì)胞浸潤(圖2.E),Baker評分顯著上升(圖2.C)以及IL-23A的mRNA表達(dá)量顯著上升(圖2.D)等癥狀,上述結(jié)果證明模型制備成功;與模型組小鼠相比,治療組小鼠各癥狀均得到明顯緩解。


結(jié)語


銀屑病作為目前臨床上最常見的炎癥性皮膚病之一,其病因及發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確,仍需要更深層次的研究與探索。通過涂抹咪喹莫特或注射IL-23進(jìn)行銀屑病小鼠模型制備的方法,操作性強(qiáng)、重復(fù)性好、造模時(shí)間短且皮損相似程度高,評價(jià)指標(biāo)清晰,能較高程度地模擬出人類銀屑病發(fā)生、發(fā)展的過程。因而適合應(yīng)用于銀屑病的臨床前藥效研究。


參考文獻(xiàn):

[1]Liang Y, Sarkar MK, Tsoi LC, et al.Psoriasis:a mixed autoimmune and autoinflammatory disease[J].Curr Opin Immunol, 2017, 49: 1-8.

[2]于博,韓建文.銀屑病動物模型研究進(jìn)展[J].皮膚病與性病,2022,44(4):290-296.
[3]SinghTP, ZhangHH, HwangST, et al . IL-23-and Imiquimod-Induced Models of Experimental Psoriasis in Mice[J]. Curr Protoc Immunol, 2019,125(1):e71.
[4]Chan J,Blumenschein W,Murphy E,et al. IL-23 stimulates epidermal hyperplasia via TNF and IL-20R2-dependent mechanisms with implications for psoriasis pathogenesis[J].2006,203(12):2577-2587.

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